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Optimización de ensayos celulares para la detección de
Optimización de ensayos celulares para la detección de
toxinas marinas responsables de intoxicaciones
alimentarias. Aplicación en extractos
lipofílicos de muestras naturales de
Mytilus galloprovincialis
Elisabet Cañete Ortiz
Aquesta tesi doctoral està subjecta a la llicència Reconeixement- CompartirIgual 3.0. Espanya
de Creative Commons.
Esta tesis doctoral está sujeta a la licencia Reconocimiento - CompartirIgual 3.0. España de
Creative Commons.
This doctoral thesis is licensed under the Creative Commons Attribution-ShareAlike 3.0. Spain
License.
ARTÍCULOS
Opimización de CBAs para la detección de toxinas marinas
3
2012
PUBLICACIONES
3.1
Artículo 1
Comparative study of the use of neuroblastoma cells (Neuro-2a) and
neuroblastoma x glioma hybrid cells (NG108-15) for the toxic effect
quantification of marine toxins
Elisabet Cañete1,2, Jorge Diogène1,2
1
Centre d' Aqüicultura, IRTA, Ctra Poble Nou s/n, 4340 Sant Carles de la Rapita.
Tarragona, Spain
2
Xarxa de Referència en Aquicultura
Artículo publicado en Toxicon (factor de impacto en 2010: 2.451)
Toxicon 52 (4), 541-550
RESUMEN
Se evalúa la idoneidad y sensibilidad de dos modelos celulares neuronales, NG10815 y Neuro-2a, a diferentes toxinas marinas bajo distintos tiempos de incubación y
exposición, y en presencia o ausencia de ouabaina y veratridina (O/V).
Las células NG108-15 fueron más sensibles a la pectenotoxina-2 que las células
Neuro-2a. Para la saxitoxina, la brevetoxina-3, la palitoxina, el ácido okadaico y la
dinofisistoxina-1 ambos tipos celulares demostraron ser sensibles y óptimos para la
evaluación toxicológica. Se obtuvieron resultados preliminares para el ácido
domoico. Las variaciones en el tiempo de incubación y de exposición demostraron
ser críticas en el desarrollo de los ensayos. A fin de reducir la duración de los
ensayos, es preferible reducir el tiempo de cultivo de las células previo a la
exposición de la toxina que el propio tiempo de exposición. Para la palitoxina,
después de 24 h de cultivo, ambos tipos celulares fueron sensibles en ausencia de
O/V. Cuando el tiempo de cultivo previo a la exposición de la toxina se redujo,
ambos tipos celulares fueron insensibles a la palitoxina en ausencia de O/V. Aunque
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la dinofisistoxina-1 y el ácido okadaico son ambos inhibidores de fosfatasas, estas
toxinas no respondieron de forma similar frente a las condiciones experimentales
estudiadas. Ambos tipos celulares fueron capaces de identificar toxinas que actúan
sobre canales de sodio dependientes de voltaje y capaces también de cuantificar el
efecto de la saxitoxina, la brevetoxina-3, la palitoxina, el ácido okadaico, la
dinofisistoxina-1 y la pectenotoxina-2 bajo diferentes condiciones experimentales.
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